一、服務(wù)簡(jiǎn)介
JC-1是一種碳氰化合物類陽(yáng)離子熒光染料,可作為檢測(cè)線粒體跨膜電位指示劑。JC-1在細(xì)胞內(nèi)以聚合體和單體兩種不同的物理形式存在,分別處于不同的熒光發(fā)射峰。當(dāng)JC-1 濃度低或膜電位水平低時(shí),主要以單體形式存在,激發(fā)波長(zhǎng)為527nm,呈綠色熒光;當(dāng)JC-1濃度升高或線粒體膜電位水平較高時(shí),形成聚合物,發(fā)出紅色的熒光,激發(fā)波長(zhǎng)為590nm。當(dāng)細(xì)胞發(fā)生凋亡時(shí),線粒體跨膜電位被去極化,JC-1從線粒體內(nèi)釋放,紅光強(qiáng)度減弱,以單體的形式存在于胞質(zhì)內(nèi)發(fā)綠色熒光,根椐這一特征就可以檢測(cè)線粒體膜電位的變化。
線粒體膜電位檢測(cè)試劑盒(JC-1)是一種以JC-1 為熒光探針,快速靈敏地檢測(cè)細(xì)胞、組織或純化的線粒體膜電位變化的試劑盒,可以用于早期的細(xì)胞凋亡檢測(cè)。
二、技術(shù)流程
1、細(xì)胞重懸于0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。;
2、用適當(dāng)?shù)姆椒ㄕT導(dǎo)細(xì)胞凋亡,同時(shí)設(shè)立陰性依照組合陽(yáng)性對(duì)照組,收集細(xì)
胞;
3、用PBS洗滌細(xì)胞三次,收集不多于1×106的細(xì)胞;
4、加入0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中37℃孵育20
分鐘。
5、在孵育期間,按照每1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入4mL 蒸餾水
的比例配制適量JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
6、37℃孵育結(jié)束后,600g 4℃離心3~4 min,沉淀細(xì)胞棄上清,注意盡量不
要吸除細(xì)胞。
7、用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌2 次:加入1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重
懸細(xì)胞,600g 4℃離心3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入1mL JC-1 染
色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g4℃離心3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
再用適量JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用流式細(xì)胞儀分析。
三、服務(wù)說(shuō)明
1、檢測(cè)細(xì)胞株(若實(shí)驗(yàn)室有,可共享)。
2、待測(cè)毒性藥物(根據(jù)實(shí)驗(yàn)方案有無(wú))。
3、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方案或參考文獻(xiàn)。
4、flowjo原文件
四、成果展示
五、詢價(jià)及訂購(gòu)
感謝您選擇我公司的JC-1細(xì)胞線粒體膜電位檢測(cè)服務(wù)。如有相關(guān)問(wèn)題請(qǐng)聯(lián)系我們的工作人員。